桑椹发酵酒污染菌的分离鉴定方法

    1.材料与方法
    1.1 主要仪器设备
    T－200型电子天平，752紫外光栅分光光度计，电热恒温培养箱，电热鼓风干燥箱，可控硅控温水浴锅，电子调温万用电炉，光学双筒显微镜，高速组织捣碎机，微生物净化室，手提式锅，JYT－架盘天平，旋涡混合器，酒精计，精密pH计，家用冰箱。
    1.2 样品的采集
    宁波天宫庄园果汁果酒有限公司被污染的发酵酒，分别从33＃、42＃、88＃、107＃罐取出。
    1.3 培养基
    1.3.1 培养基
    （1）MRS培养基：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，吐温－80 1g，磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，MnSO4.H2O 0.2g，MgSO4・7H2O 0.04g，琼脂20g，pH6.3，蒸馏水1000mL。
    （2）营养琼脂培养基（NA）：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20g，pH 7.2―7.4，蒸馏水1000mL。
    （3）WLN培养基：葡萄糖50g，酵母提取物4g，蛋白胨5g，FeCl3・6H2O 0.0025g，KCl 0.425g，MgSO4・7H2O 0.125g，MnSO4 0.0025g，CaCl2・2H2O 0.125g，琼脂20g，pH5.5―5.8，蒸馏水1000mL。

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桑椹发酵酒平板分离培养方法

（1）稀释分离：取数支无菌空试管排列于试管架上，根据待稀释的浓度分别依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，并向试管中各加入9ml无菌生理盐水。 用1ml无菌吸管吸取1ml已混匀的待测酒样，注入10-1试管中。然后，另取1支无菌吸管，于10-1试管中来回吹吸三次，使之混匀，即成10-1稀释液。